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生物酶

全能核酸酶

时间:2023-12-05 10:58:53 来源: 点击:512次

产品介绍

全能核酸酶是一种源于粘质沙雷氏菌(Serratia Marcescens)并经基因工程和蛋白质工程改造的非特异性核酸内切酶,能在较广泛的温度(0-42℃)、pH(6-10)、试剂(0-6M脲,1-10mM Mg2+,0-100mM还原剂(DTT、β-巯基乙醇),0-1mM EDTA,0-0.1% SDS等)等范围内能降解所有形式的核酸,包括单链、双链、线性、环状、超螺旋等DNA和RNA,一般将核酸完全消化为2-5个碱基长度的寡核苷酸。

全能核酸酶可用于去除蛋白质产品种的核酸,以达到符合药品要求的宿主核酸残留,也可配套用于多种细胞细菌的破碎裂解,去除菌体裂解后释放的核酸,降低料液的黏度,提高蛋白质提取效率。


属性信息

名称

全能核酸酶,Benzonase Nuclease,Benzonase

来源

大肠杆菌

分子量

26.8kDa

等电点

6.20

纯度

≥95%(SDS-PAGE)

A280nm(1mg/mL)

1.683

形态

液体,成分:1mg/mL全能核酸酶,20mM Tris-HCl pH8.0,2mM MgCl2,20mM NaCl,50% (v/v) 甘油

活性

≥1×106U/mg

活性定义

pH8.0、37℃,在30min内使A260nm吸收值变化1.0(相当于完全消化37μg鲑鱼精 DNA)所用的酶量定义为一个活性单位(U)

存储

-18±4℃,避免-23℃以下结冰(结冰会导致活性下降)

有效期

两年

运输

室温或低温

 


M: 蛋白质分子量标准品

1: 全能核酸酶


使用方法

一般可按照待处理样品的0.1%体积添加全能核酸酶,添加混匀后室温孵育30min,即可进行后续操作。

注意事项

(1)如缓冲液成分超出推荐范围(见下表),全能核酸酶的活性可能会降低,可考虑提高全能核酸酶的使用量(如提高至0.1-1%添加量),建议进行小量样品测试后再进行放大处理。

项目

推荐范围

有效范围

Mg2+

1-2mM

1-10mM

pH

8-9

6-10

温度

37℃

0-42℃

DTT

0-100mM

>100mM

β-巯基乙醇

0-100mM

>100mM

Na+、K+等单价阳离子

0-20mM

0-150mM

磷酸根离子

0-10mM

0-100mM

脲

0-2M

0-6M

EDTA

0-0.1mM

0-1mM

SDS

0-0.01%

0-0.1%

(2)在处理样品量较少时,全能核酸酶添加量很少,可用缓冲液(50mM Tris-HCl, 20mM NaCl, 2mM MgCl2, pH 8.0)进行稀释后添加,用该缓冲液稀释后,可在2-8℃存放数天。

(3)虽然全能核酸酶需要Mg2+保持活性,但一般情况下无需额外添加Mg2+。

(4)本产品无纯化标签,在目标物的后续分离纯化过程中可去除,全能核酸酶的活性残留也可通过与DNA或RNA标准品反应并经琼脂糖凝胶电泳检测。


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